Описание:

Назначение: набор Liver--9-line предназначен для качественного/полуколичественного определения человеческих IgG-антител к антигенам, ассоциированным с аутоиммунными заболеваниями печени (АИЗП) в образцах сыворотки или плазмы методом иммуноблота с целью диагностики АИЗП.
Антигены: высокоочищенные белки SLA/LP, LKM-1, LC1, sp100, gp210, митохондриальный антиген M2 (AMA-M2), индивидуальные белки гладких мышц F-актин, актинин, тропомиозин.
Приложения теста: определение аутоантител играет важную роль в диагностике следующих заболеваний печени - аутоиммунного гепатита (АИГ), первичного билиарного цирроза (ПБЦ, PBC), первичного склерозирующего холангита (ПСХ) у детей и взрослых. Аутоиммунный гепатит - это хроническое заболевание печени неясной этиологии. АИГ встречается очень редко (приблизительно 50-200 больных на 1 миллион). Типичными для данного заболевания являются повышенный уровень трансаминаз, гипергаммаглобулинемия и повышенные титры антиядерных антител (ANA) и/или антител к гладкой мускулатуре (ASMA). Гистологически выявляются признаки перипортального гепатита и инфильтрация портальной зоны лимфоидными клетками.
Заболевание встречается во всех возрастных группах, как у мужчин, так и у женщин, хотя женщины болеют чаще. При отсутствии лечения болезнь прогрессирует до цирроза и/или варикоза вен пищевода. В этом случае смертность высокая. АИГ часто развивается бессимптомно. Пациенты отмечают тошноту, постоянную усталость и боль в суставах и мышцах. Также могут присутствовать симптомы хронического заболевания печени, вплоть до цирроза печени. У большой части пациентов это заболевание часто диагностируется на бессимптомной стадии, в процессе обследования при увеличенном объеме печени. Так как прогноз значительно улучшается при своевременном лечении, то большое значение имеет ранняя диагностика. Основываясь на различии выявляемых аутоантител дифференцируют АИГ типа I (АИГ-1) и АИГ типа 2 (АИГ-2). В то время как АИГ-1 встречается во всех возрастных группах, АИГ-2 обычно диагностируется в молодом возрасте и у детей. АИГ-2 составляет только небольшую часть всех случаев АИГ, но этот тип очень быстро прогрессирует с возможным тяжелым исходом.
В дополнение к АИГ, ПБЦ и ПСХ существуют также смешанные (перекрестные, overlap) синдромы и ассоциации этих заболеваний с другими внепеченочными аутоиммунными заболеваниями и гепатитом С. 2-е поколение метода Liver--9-line от ORGENTEC - это иммуноблот для идентификации различных серологических профилей аутоиммунных заболеваний печени. Одновременное обнаружение аутоантител против 9 различных антигенов позволяет дифференцировать подтипы АИГ и исключить другие заболевания печени.
Характеристика специфических антител: 
AMA-M2: антимитохондриальные антитела (AMA) - это гетерогенная группа аутоантител против различных белков внутренней и внешней сторон митохондриальной мембраны. AMA подтипа M2 направлены к эпитопам пируватдегидрогеназного комплекса. Высокая чувствительность и специфичность аутоантител M2 делают их прекрасным инструментом для выявления первичного билиарного цирроза: AMA определяются в 90-95% случаев у больных ПБЦ. AMA также определяются у примерно 25% больных АИГ, хотя в этих случаях титры обычно низкие.
sp100, gp200: маркеры ПБЦ, связанные с тяжестью течения и плохим прогнозом. Это два типа специфических антител к ядерным компонентам характерны для ПБЦ. Они в основном взаимодействуют с антигеном ядрышек SP100 и антигеном ядерных пор gp210, соответственно. Они особенно важны в случае AMA-M2 отрицательных пациентов с ПБЦ и редко встречаются в ассоциации с АИГ или ПСХ. Антитела к gp210 связаны с внепеченочными проявлениями.
SLA/LP: антитела к растворимому антигену печени (SLA/LP) и поджелудочной железы - это высоко специфичный маркер АИГ-1. Аутоантиген-мишень – цитозольный белок с м.м. 50 кД относится к рибонуклеопротеидному комплексу. Они связываются с UGA тРНК супрессор-ассоциированным антигенным белком (tРНК (Ser) Sec) и были предложены в качестве специфического маркера тяжелого АИГ третьего типа, серонегативного для обычных АИГ-1 аутоантител. Сходство клинического профиля между пациентами с АИГ-1 (ANA и/или ASMA позитивными) и пациентами с АИГ только с анти-SLA антителами в дополнение к приблизительно 30% серопозитивного перекреста между анти-SLA и ASMA и / или ANA предполагает, что анти-SLA является скорее дополнительным важным маркером для диагностики АИГ-1, чем маркером АИГ-3. Анти-SLA антитела обнаруживают у пациентов с более тяжелым течением АИГ. 
Криптогенный аутоиммунный гепатит характеризуется клинической картиной, которою невозможно отличить от аутоиммунного гепатита. Результаты анализа ANA, ASMA и анти-LKM-1 отрицательны в начале заболевания и могут появляться позже. Анти-SLA могут быть положительными у 12-30% больных с криптогенным гепатитом.
LKM-1 и LC1: антитела к микросомам 1 типа печени и почек (LKM-1) и антитела к цитозольному антигену 1 типа печени (LC-1) являются специфическими серологическими маркерами АИГ-2. У пациентов с АИГ-2 с положительными результатами анализа анти-LC1 антител гистологически выявляется более серьезное заболевание по сравнению с пациентами без анти-LC1 антител. Аутоантиген-мишень анти-LKM-1 антител – цитохром P450 2D6 (CYP2D6). Аутоантиген-мишень антител к LC-1 – фермент формиминотрансфераза циклодеаминаза (FTCD). Антитела к LC1 выявляются вместе с анти-LKM-1 у 25-48% пациентов с АИГ-2 или изолированно у 22%. Аутоантитела против LC1 первоначально были выявлены на основании их специфического паттерна флуоресценции. Они показали интенсивную гомогенную цитоплазматическую флуоресценцию, похожую на паттерн анти-LKM-1 аутоантител, особенно в перипортальных гепатоцитах, и умеренно в перивенозных гепатоцитах вокруг центральной вены. В отличие от LKM-1 аутоантител они не связываются с проксимальными канальцами почки крысы. Когда LKM-1 и LC1 присутствуют одновременно, характерный паттерн флуоресценции LC1 маскируется LKM-1 флуоресценцией, и обнаружение анти-LC1 в этом случае неуспешно. Хронический вирусный гепатит С (HCV) тесно связан с аутоиммунным гепатитом. Анти-LC1 антитела были обнаружены спорадически у анти-LKM-1 антитела позитивных пациентов, страдающих хроническим HCV. Недавнее исследование показало, что 50% пациентов с анти-LKM-1 и анти-LC1 антителами инфицированы вирусом гепатита С. В отличие от анти-LKM-1, титр антител к LC1 коррелирует с активностью заболевания. Показано, что анти-LC1 - единственный серологический маркер, выявляемый у 10% больных АИГ.
ASMA-антигены F-актин, актинин и тропомиозин: ASMA являются типичными маркерами АИГ-1. Они представляют собой гетерогенную популяцию антител и распознают различные антигены гладкой мускулатуры. Среди них белки F-актин, альфа-актинин и тропомиозин - структурные блоки микрофиламентов. Определение отдельных антигенов гладких мышц F-актина, альфа-актинина и тропомиозина позволяет лучше охарактеризовать этот важный для диагностики маркер (ASMA). Актин – глобулярный белок со многими функциями, который образует линейный полимер, называемый F-актин (фибриллярный актин). Две спиральные переплетающиеся полимерные цепи F-актина формируют микрофиламент (нить). Микрофиламент F-актина также содержит нитевидную молекулу тропомиозина, которая обернута вокруг F-актиновой спирали. Подобно тропомиозину альфа-актинин также принадлежит к группе связанных с актином белков. Это вносит свой вклад в формирование пучков нитей и перекрестное сшивание волокон. Анти-F-актин и анти-альфа-актинин аутоантитела обнаруживаются одновременно у более чем 60% больных АИГ-1. Сочетание обоих типов антител отражает высокую активность заболевания. Анти-F-актин антитела положительны у пациентов с активным прогрессирующим заболеванием. Низкие титры антител против альфа-актинина в исходный момент наблюдения, кажется, предсказывают ответ на лечение, и снижение титров анти-альфа-актинин антител может быть использовано для оценки эффективности лечения при АИГ 1. В дополнение к F-актину и актинину тропомиозин является одной из наиболее важных мишеней для аутоантител при аутоиммунных заболеваниях печени. Примерно у одной трети пациентов с АИГ также образуются антитела против тропомиозина. В подгруппе пациентов с ПБЦ также были обнаружены антитела против тропомиозина.

 

Поставщик: Orgentec(Германия)